Minggu, 23 Juni 2013

Hemoglobin (Hb)

HEMOGLOBIN (Metode Cyanmeth)

Metode
Metode yang digunakan adalah metode sianmethaemoglobin (hemoglobin sianida) atau fotometer.
Prinsip
Hemoglobin dioksidasi oleh kalium ferrosianida menjadi methaemoglobin yang kemudian bereaksi dengan kalium sianida membentuk sianmethaemoglobin yang berwarna merah. Absorbansi larutan diukur pada panjang gelombang 540 nm. Larutan Drabkin’s yang dipakai pada cara ini mengubah hemoglobin menjadi sianmethaemoglobin yang akan diukur menggunakan fotometer.
 Alat dan Reagensia
Alat
1.      Torniquet
2.      Kapas alkohol 70%
3.      Spuit
4.      Plester
5.      Tabung vacutainer dengan antikoagulan EDTA
6.      Tabung reaksi 12 cm dan rak tabung
7.       Pipet volume 5,0 mL
8.      Ball filer
9.      Mikropipet 20 μl
10.  Tip kuning
11.  Fotometer
Reagensia
                                             1.      Reagensia yang digunakan dalam penelitian ini adalah Larutan Drabkin’s

 Cara Kerja
            Pemeriksaan Kadar Hemoglobin
Langkah-langkah yang digunakan untuk pemeriksaan kadar hemoglobin, yaitu :
1.   Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2.   Siapkan tabung reaksi 12 cm untuk pemeriksaan.
3.   Pipet 5.0 mL Larutan Drabkin’s kemudian masukkan ke dalam tabung reaksi.
4.   Pipet darah dengan menggunakan mikropipet sebanyak 20 µl sebelah ujung luar pipet dibersihkan lalu darah itu dimasukkan ke dalam tabung dengan membilasnya beberapa kali.
5.   Campurlah isi tabung dengan membaliknya beberapa kali. Tindakan ini juga akan dapat melakukan perubahan dari hemoglobin menjadi sianmethaemoglobin.
6.   Inkubasi pada suhu kamar selama ± 5 menit.
7. Periksa kadar hemoglobin menggunakan fotometer pada gelombang 540 nm dengan faktor 27.920, sebagai blanko digunakan Larutan Drabkin’s.
8.   Catat hasil pemeriksaan kadar hemoglobin.


0 komentar:

Posting Komentar